Commentaire
Protocole élèves (d’après TP de biologie, D. POL, Bordas 1994, p. 132).
- Remplir le réacteur d’une suspension de levures affamées à 10 g/L (80 mL pour un bécher de 100 mL).
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Placer la sonde à dioxygène.
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Paramétrer la console LabQuest (t = 20 min).
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Lancer les mesures.
- À t = 3 min injecter très doucement 1 mL de solution de glucose à 10 g/L
- Attendre la fin de la manipulation (pendant ce temps commencer l'exploitation du document 2).
Exploitation
- Connecter LabQuest à un ordinateur supportant Logger Pro (autoriser plusieurs récupérations)
- Possibilité : Insérer / Annotation(s)
- Possibilité d'imprimer, etc.
Exemple d'enregistrement
- Version Logger Pro - Version Word
Dans cet enregistrement, une deuxième injection de 1 mL de solution de glucose à 10 mg/L est effectuée à 900 secondes (artefact d'injection).
Données scientifiques
L’activité respiratoire est maximale avec le glucose et le saccharose, nettement inférieure avec le maltose. Le lactose n’est pas un substrat de la respiration.
Souche rho+ : souche de levure comprenant un ADN mitochondrial intact et fonctionnel comme dans des souches sauvages.
Souche rho0 : souche de levure dépourvue d’ADN mitochondrial, caractérisée par une incapacité de croissance dans un milieu contenant une source de carbone non fermentescible et une absence de synthèse protéique mitochondriale.
Souche rho- : souche de levure comprenant une large délétion du génome mitochondrial, phénotypiquement équivalente aux souches rho0.
Autres manipulations possibles
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Mise en évidence de l'activité métabolique cellulaire : vert janus (colorant spécifique des mitochondries actives, cf. TP de Biologie des levures de D. Pol) et bleu de méthylène sur levures ; nitrate d'argent sur cellules chlorophylliennes.
- Bleu de méthylène, colorant vital : les cellules vivantes sont colorées en bleu clair, les cellules mortes en bleu foncé : cette technique permet d'apprécier de façon assez précise le pourcentage de cellules mortes contenues dans une suspension de levure.
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Mise en évidence du contrôle du métabolisme par le patrimoine génétique : cultures de levures « petites » et « grandes » (rythme de division et propriétés cytoplasmiques).
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Montrer la notion de transformations chimiques dans la cellule : culture sur milieu minéral ou organique et observation d'une production de matière (culture de levures et mesure de la population par EXAO - colorimétrie - ou comptage, etc.).
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Échange d'énergie et activité métabolique des cellules : mesure de la température au sein de cultures de levure en milieu aérobie et anaérobie.
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