Effet mutagène des UV chez une levure
 
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Objectif de connaissance. L’été, les bulletins météorologiques mettent en garde contre l’effet nocif des rayons ultra violets (UV) du Soleil. On cherche à vérifier la cause de cette mise en garde .
Hypothèse. Les rayons UV provoquent des mutations.
CE TP SE DÉROULE SUR DEUX SEANCES
Le compte-rendu est à rendre à la fin de la deuxième séance
Activité Capacités - Exigences - Conseils
Séance
1
Réaliser la manipulation proposée et en prévoir les résultats.
Manipuler et expérimenter
- Strict respect du protocole proposé.
- Quand des levures se multiplient un grand nombre de fois sur un milieu gélosé (solide) chaque cellule donne naissance à une colonie visible à l'œil nu.
- Croquis commenté de l’aspect de chaque boîte après un grand nombre de divisions cellulaires si l'hypothèse est validée.
Séance
2
Représenter et interpréter les résultats de l’expérience. Pratiquer une démarche scientifique
- Compter le nombre de colonies dans chaque boîte de Pétri.
- Représenter les résultats sous forme d'un tableau.
- Raisonner avec rigueur puis conclure sur la validité de l'hypothèse.
Pour travailler ce sujet à la maison voir le manuel (Nathan 1e S) p. 86,87 - exercices : 6, 7, 8 p. 100 et 101. .

Matériel

Préparer à l'avance
Kit mutagenèse - Effets des UV sur la levure Ade 2 (SORDALAB), suivre strictement le protocole Sordalab.
- Préparer les suspensions A et B au dernier moment (au début de chaque séance) sinon il ya lyse cellulaire.
- Régler par avance la température de l’étuve à 29°C exactement.
- Après mise en étuve, le temps nécessaire au rougissement des cellules est de 4 à 5 jours (les cellules rougissent en fin de croissance).
- Après coloration placer les boîtes de Pétri au réfrigérateur jusqu'à la séance 2.

Séance 1

Polycopiés
- 1 fiche élève par élève
- 12 fiches poste

Dans la salle
- Fiches élèves : 1 exemplaire par élève, sur le bureau professeur.
   Hotte à flux laminaire
- Hotte lavée à l'eau de javel, en veille et contenant 2 Mutabox en situation stérile.
- 2 Mutabox allumés 1h avant la séance et réglées en secondes.
- 1 petit tournevis pour régler les Mutabox.
  Paillasse latérale ou table du premier rang
- Vortex (agitateur électrique pour tubes à essais)
- 1 boîte de levures Ade- (en démonstration)
- 2 flacons de savon liquide
- 2 essuie-mains propres - À renouveler pour le groupe 2.
   Pour la classe ou par poste
 - 1 tube de suspension A (levures non diluées) - À renouveler pour le groupe 2.
 - 1 tube de suspension B (levures diluées au 1/10) - À renouveler pour le groupe 2.

Par poste de travail
- 2 exemplaires de la fiche poste (sous pochette plastique).
- 3 masques antibactériens - À renouveler pour le groupe 2.
- 5 boîtes de Pétri (milieu YPG) - À renouveler pour le groupe 2.
- 1 marqueur permanent
- 1 lot de râteaux de microbiologie
- 1 « champ stérile » : plateau + bec électrique
- 1 micropipette automatique 100 µL (à défaut 50 µL)
- 2 embouts stériles jaunes pour pipette automatique - À renouveler pour le groupe 2.
- 1 pissette d’eau de Javel
- 1 papier absorbant - À renouveler pour le groupe 2.

Séance 2 (voir au verso)

Dans la salle
- Les cultures réalisées lors de la séance 1.
- 2 exemplaires de la fiche poste (sous pochette plastique).

Par poste de travail
- 2 exemplaires de la fiche poste (sous pochette plastique).


Commentaire

Conduite des séances
- Séance 1/2 : durée 45 min puis 1s12tp2
- Séance 2/2 : durée 45 min puis 1s12tp3

Sitographie
- Etude pratique de la mutagénèse chez la levure : http://www.didier-pol.net/4MUT-LEV.html
- Mutagénèse chez les levures : www.snv.jussieu.fr
- Mutagénèse chez une levure ADE2 : www.snv.jussieu.fr
- Utlisation du bec électrique : labophysiquechimie.chez-alice.fr